临床血脂测定与应用中存在哪些问题？(2)

　　3 血脂测定的方法学与标准化

　　3.1血脂测定的方法学

　　目前国内建议临床实验室采用胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（CHOD-PAP法）、甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（GPO-PAP法）分别作为测定血清TC、TG的常规方法［2，8］。一般临床实验室可采用一步GPO-PAP法，有条件的实验室（如三级以上医院）应考虑开展游离甘油（FG）的测定或采用两步酶法。因为有些异常或病理情况下如应激反应（肾上腺素激活LPL促进体内脂肪水解），剧烈运动，服用含甘油的药物如硝酸甘油，静脉输入含甘油的营养液，肝素治疗，某些严重的糖尿病、肝病与肾病，取血器材或试管塞上带有甘油等时，可见血清FG显著升高，并给临床决策带来误导。因此，需要注意血清FG对TG测定结果的影响。

　　通常需根据各种脂蛋白的密度、颗粒大小、电荷等应用超速离心法、色谱法、电泳法、化学或免疫沉淀法将HDL、LDL与其他脂蛋白分离开，测定HDL或LDL组分中胆固醇含量（HDL-C或LDL-C）。目前建议用双试剂的直接匀相测定法（homogeneous method）作为临床实验室测定血清HDL-C、LDL-C的常规方法［2，8］ 。可供选择的测定HDL-C方法主要有：清除法（Clearance method）包括反应促进剂-过氧化物酶清除法（synthetic polymer/detergent HDL-C assay，SPD法）和过氧化氢酶清除法（catalase HDL-C assay，CAT法），PEG修饰酶法（PEG-modified enzyme HDL-C assay，PEGME法），选择性抑制法（polyanion polymer/ detergent HDL-C assay，PPD法），免疫分离法（immunoseparation method， IS法）包括PEG/抗体包裹法（International Reagents Corp HDL-C assay，IRC法）和抗体免疫分离法（antibody immunoseparation HDL-C assay ，AB法）。以前3类方法为目前国内临床实验室最常用。可供选择的测定血清LDL-C的方法主要有：表面活性剂清除法（surfactant LDL-C assay，SUR法），过氧化氢酶清除法（catalase LDL-C assay，CAT法），可溶性反应法（solubilization LDL-C assay，SOL法），保护性试剂法（protecting reagent LDL-C assay，PRO法）和杯芳烃法（calixarene LDL-C assay，CAL法）。以前3类试剂为国内临床实验室最常用。

　　目前尚无公认的血清apoAI、apoB 和Lp（a）测定的参考方法。目前建议免疫浊度法［包括免疫散射比浊法（immunonephelometry，INA）和免疫透射比浊法（immunoturbidimetry，ITA）］作为临床实验室测定血清apoAⅠ、apoB和Lp（a）的常规方法，首选ITA法，其次为INA法［2，8］ 。

　　3.2 血脂测定的参考系统

　　目前美国已建立较完整的TC、TG测定的参考系统，其决定性方法都是由美国国家标准与技术研究所（NIST）建立的核素稀释-质谱法（ID-MS法）。HDL-C、LDL-C目前暂没有决定性方法和一级参考物质，只有参考方法和二级参考物质。apoAⅠ、apoB和Lp（a）测定的标准化问题非常复杂，目前尚无公认的决定性方法与参考方法，仅CDC建立了一个apoAⅠ测定的HPLC-MS候选决定性方法。表2为目前国内外公认的血脂与脂蛋白分析参考系统［8］ 。

（责任编辑：实习陈碎银）